AVT成立十余年來(lái)，專注脂質(zhì)體、脂肪乳、微納米靶向制劑等遞藥體系，本期AVT為大家分享淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)的研究進(jìn)展,文章內(nèi)容來(lái)自《中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)》2020年第51卷第4期“藥學(xué)前沿”欄目文章《淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)在抗腫liu轉(zhuǎn)移治療中的研究進(jìn)展》，作者：馮旸,徐霄,莫然。
摘要
淋巴轉(zhuǎn)移是腫瘤轉(zhuǎn)移的主要途徑之一，傳統(tǒng)藥物治療腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移的局限在于藥物在淋巴轉(zhuǎn)移灶的濃度低導(dǎo)致療效不佳。納米藥物遞送系統(tǒng)在增強(qiáng)藥物靶向性、提高藥物生物利用度、降低藥物不良反應(yīng)等方面發(fā)揮著重要作用。本綜述介紹了淋巴系統(tǒng)的組成和功能，闡述了淋巴系統(tǒng)在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用，列舉了現(xiàn)有的抗腫liu淋巴轉(zhuǎn)移治療手段及局限性，重點(diǎn)闡述被動(dòng)、主動(dòng)以及抗原遞呈細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)在抗腫liu轉(zhuǎn)移治療中的研究進(jìn)展。
正文
腫瘤轉(zhuǎn)移是指腫瘤細(xì)胞從原發(fā)灶脫落，經(jīng)淋巴管或血管等遷移至其他部位繼續(xù)生長(zhǎng)的過(guò)程。這一過(guò)程包括：
（1）從原位灶上脫落后的細(xì)胞內(nèi)滲進(jìn)入淋巴管或血管，隨后進(jìn)入血液，形成循環(huán)腫瘤細(xì)胞；
（2）在逃過(guò)免疫系統(tǒng)的監(jiān)察后，部分循環(huán)腫瘤細(xì)胞得以存活；
（3）存活的腫瘤細(xì)胞在其他器官或組織增殖，形成局部轉(zhuǎn)移；
（4）逐漸適應(yīng)新環(huán)境后，腫瘤細(xì)胞繼續(xù)增殖形成最終的轉(zhuǎn)移灶。
研究顯示腫瘤轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致腫瘤患者死亡的最主要原因。腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移往往具有一定方向性，像“種子”一樣，向著更適合其生長(zhǎng)的微環(huán)境進(jìn)行選擇性遷移。例如，乳腺癌易發(fā)生肺、骨和腦轉(zhuǎn)移，結(jié)腸癌易發(fā)生肺和肝轉(zhuǎn)移，胰腺癌易發(fā)生肝轉(zhuǎn)移。相較于血行轉(zhuǎn)移，惡性腫瘤更易借助淋巴系統(tǒng)發(fā)生轉(zhuǎn)移。手術(shù)切除、化療和放療是傳統(tǒng)腫瘤治療方法。然而，當(dāng)腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移時(shí)，可能會(huì)有多個(gè)轉(zhuǎn)移灶（如淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移），通過(guò)手術(shù)切除和放療很難*所有的轉(zhuǎn)移灶，同時(shí)對(duì)患者損害較大。而系統(tǒng)給藥的化療藥物往往駐留在血液或臟器中，很難進(jìn)入淋巴系統(tǒng)，嚴(yán)重影響對(duì)淋巴轉(zhuǎn)移灶的治療效果。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)借助淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)，可改善藥物在淋巴系統(tǒng)中的分布，在抗腫liu轉(zhuǎn)移治療中展現(xiàn)出巨大的潛力。本綜述以腫瘤轉(zhuǎn)移和淋巴系統(tǒng)的關(guān)系為切入點(diǎn)，介紹淋巴系統(tǒng)的組成及功能，闡述淋巴系統(tǒng)在腫瘤轉(zhuǎn)移進(jìn)程中的重要性，并重點(diǎn)介紹靶向淋巴系統(tǒng)的藥物遞送系統(tǒng)在抗腫liu轉(zhuǎn)移中的研究進(jìn)展。
01 淋巴系統(tǒng)與腫瘤轉(zhuǎn)移
1.1 淋巴系統(tǒng)的組成和功能
淋巴系統(tǒng)由淋巴組織、淋巴器官與淋巴管道構(gòu)成，不僅是機(jī)體重要的循環(huán)系統(tǒng)，也是重要的防御系統(tǒng)?？乖f呈細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、外周抗原等通過(guò)傳入淋巴管引流進(jìn)入淋巴結(jié)。淋巴結(jié)內(nèi)潴留著大量包括B、T淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞，對(duì)機(jī)體的免疫功能起著重要作用。
1.2 淋巴系統(tǒng)在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用
腫瘤轉(zhuǎn)移主要分為血行轉(zhuǎn)移和淋巴轉(zhuǎn)移兩種途徑。大量研究表明，淋巴系統(tǒng)可能比血液系統(tǒng)更易于為腫瘤細(xì)胞提供轉(zhuǎn)移通道，其主要原因?yàn)椋?/span>
（1）淋巴管的特殊結(jié)構(gòu)。與血管結(jié)構(gòu)相比，淋巴管的內(nèi)皮細(xì)胞間連接較松散，基底膜不夠完整，使得腫瘤細(xì)胞更易進(jìn)入淋巴管。
（2）淋巴液流速慢。血流速度是淋巴流速的100~500倍。較低的淋巴壓力降低了機(jī)械變形和剪切應(yīng)力對(duì)處于其中的細(xì)胞的物理?yè)p傷，使得腫瘤細(xì)胞在淋巴系統(tǒng)中更易存活。
（3）無(wú)血清的淋巴環(huán)境。血清毒性在一定程度上降低了血液中腫瘤細(xì)胞的活力，而淋巴的成分與組織間液十分相近，不存在血清，因而細(xì)胞在淋巴液中有著更高的活力。
（4）趨化因子受體的作用。一些趨化因子及相關(guān)受體在轉(zhuǎn)移器官的選擇中起著至關(guān)重要的作用。例如，趨化因子受體（CXCR3、CXCR4）在淋巴轉(zhuǎn)移的過(guò)程中起關(guān)鍵作用。Kawada等利用RNA干擾（RNAi）技術(shù)構(gòu)建了低表達(dá)CXCR3的黑色素瘤細(xì)胞，將其接種于小鼠體內(nèi)后發(fā)現(xiàn)，與正常的黑色素瘤細(xì)胞比，低表達(dá)CXCR3的腫瘤細(xì)胞向腘窩淋巴結(jié)的遷移明顯減少，但并不影響其向肝、肺的血源性轉(zhuǎn)移，證明了某些趨化因子及受體會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的淋巴轉(zhuǎn)移，而對(duì)血液轉(zhuǎn)移并無(wú)顯zhu影響。
總之，淋巴系統(tǒng)是許多實(shí)體瘤（如黑色素瘤、乳腺癌等）擴(kuò)散的主要途徑。腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移后，治療難度增大，患者的預(yù)后不佳。例如，在黑色素瘤治療中，患者的轉(zhuǎn)移陽(yáng)性的淋巴結(jié)數(shù)目越多，五年生存率越低。因此，抑制腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移成為現(xiàn)今腫瘤治療領(lǐng)域的研究重點(diǎn)之一。
1.3 抗腫liu淋巴轉(zhuǎn)移的治療手段
淋巴結(jié)清掃及放療是臨床上治療腫瘤轉(zhuǎn)移的常用手段，但侵襲性較大，會(huì)導(dǎo)致包括淋巴水腫、淋巴系統(tǒng)循環(huán)功能受損等不良反應(yīng)。而通過(guò)靜脈或口服給藥的化療藥物因無(wú)法在淋巴系統(tǒng)富集，不能有效殺死轉(zhuǎn)移灶內(nèi)的腫瘤細(xì)胞。Ryan等發(fā)現(xiàn)大鼠靜脈注射游離阿霉素后，幾乎所有時(shí)間點(diǎn)下淋巴液中阿霉素的濃度都低于血漿中的濃度，表明靜脈給藥后化療藥物無(wú)法有效的濃集于淋巴系統(tǒng)。如何提高藥物在淋巴系統(tǒng)中的分布是近年來(lái)治療腫瘤轉(zhuǎn)移的主要研究方向之一。鑒于此，研究者們通過(guò)對(duì)藥物進(jìn)行化學(xué)改性以及利用藥物遞送系統(tǒng)以期提高淋巴系統(tǒng)中的藥物量。一方面，通過(guò)將藥物與疏水性基團(tuán)共價(jià)偶聯(lián)提高藥物的親脂性，增加口服給藥后藥物的腸道淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)。但是，許多藥物不具備化學(xué)修飾的條件或修飾后活性降低，限制了藥物的療效。另一方面，構(gòu)建淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)，通過(guò)物理包埋或化學(xué)偶聯(lián)將藥物荷載于載體中，不僅可改善藥物的溶解度，降低藥物的毒性，還可通過(guò)尺寸效應(yīng)等富集于淋巴組織，提高藥物在淋巴系統(tǒng)中的分布。
02 淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)
納米藥物遞送系統(tǒng)是一種以納米技術(shù)為基礎(chǔ)的新興藥物遞送系統(tǒng)。納米藥物遞送系統(tǒng)可增加藥物的溶解度，提高藥物的生物利用度，降低其不良反應(yīng)，是提高藥物成藥性的重要手段之一。已有多種抗腫liu藥物的納米制劑用于腫瘤的臨床治療，如阿霉素聚乙二醇化脂質(zhì)體制劑（Doxil）、紫杉醇白蛋白納米粒制劑（Abraxane）等。近年來(lái)，基于納米載體的藥物遞送策略用于治療腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移受到越來(lái)越多的關(guān)注。以間質(zhì)給藥為例，納米載體借助尺寸效應(yīng)，通過(guò)組織間隙中水通道，優(yōu)先從間質(zhì)中通過(guò)被動(dòng)靶向作用進(jìn)入淋巴管。納米藥物遞送系統(tǒng)不僅可用于治療某些淋巴相關(guān)的原發(fā)性腫瘤，如原發(fā)性淋巴瘤或白血病，也可用于治療并發(fā)淋巴轉(zhuǎn)移的其他腫瘤，如黑色素瘤、乳腺癌等。納米載體輔助藥物進(jìn)入淋巴管并富集于淋巴結(jié)，對(duì)治療腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移有著較好的療效。
2.1 影響淋巴吸收的因素
2.1.1 給藥途徑
藥物可以通過(guò)口服、靜脈、間質(zhì)以及直接注射等給藥方式進(jìn)入淋巴系統(tǒng)。口服的藥物和納米載體都會(huì)首先通過(guò)腸上皮細(xì)胞，隨后進(jìn)入血管或淋巴管。在這一過(guò)程中，相比于小分子藥物，納米載體更易進(jìn)入淋巴系統(tǒng)。Attili-Qadri等研究發(fā)現(xiàn)口服給藥后，與游離多西他賽相比，納米載體顯zhu提高多西他賽的生物利用度。這是由于納米載體增加了多西他賽的淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)，減少了首過(guò)效應(yīng)。然而，納米載體在胃腸中的穩(wěn)定性及其在胃腸道黏膜上的滲透性會(huì)影響其進(jìn)入淋巴系統(tǒng)的效率。靜脈給藥能夠避免口服給藥的首過(guò)效應(yīng)，然而當(dāng)藥物進(jìn)入血液中后，需要首先滲入組織間質(zhì)中，隨后才能被淋巴系統(tǒng)吸收，這一過(guò)程效率很低。間質(zhì)給藥是一種局部給藥方式，包括肌肉、皮下、皮內(nèi)給藥。間質(zhì)給藥后，納米載體富集于組織間質(zhì)，由于淋巴內(nèi)皮細(xì)胞間的間隙大、缺乏基底膜等特性，納米載體更易進(jìn)入淋巴管。皮內(nèi)具有更高的組織間隙壓力和較高的淋巴流速，因此在這3種間質(zhì)給藥方式中，皮內(nèi)給藥后淋巴吸收效率zui高。此外，淋巴結(jié)內(nèi)給藥可將藥物直接注射至淋巴系統(tǒng)，這種一步到位的方式雖然看似方便，但費(fèi)時(shí)費(fèi)力，技術(shù)難度較大。并且，由于淋巴結(jié)的體積很小，一次給藥劑量非常有限，無(wú)法達(dá)到有效藥物濃度，導(dǎo)致治療效果不佳，而多次注射會(huì)損傷淋巴結(jié)，嚴(yán)重限制了淋巴結(jié)內(nèi)給藥方式的實(shí)際應(yīng)用。
2.1.2 粒徑大小
納米粒的粒徑大小大大影響了其進(jìn)入淋巴管及駐留于淋巴結(jié)的效率。間質(zhì)給藥后，小粒徑（<10 nm）的納米粒更易進(jìn)入血管，而大粒徑（10~100 nm）的納米粒由于尺寸限制不能進(jìn)入血管，而更易進(jìn)入淋巴管。但是，粒徑更大（>100 nm）的納米粒反而不易進(jìn)入淋巴管，這是因?yàn)殚g質(zhì)中用來(lái)引流的通道直徑為100 nm左右，所以粒徑大于100 nm的納米粒由于對(duì)流和擴(kuò)散能力差會(huì)大量保留于注射部位，大多通過(guò)抗原遞呈細(xì)胞攝取后隨其一同進(jìn)入淋巴管。Rao等合成了粒徑分別為50、100、200 nm的聚合物納米粒，足墊給藥6 h后50 nm的納米粒在腘窩淋巴結(jié)處的聚集顯zhu高于其他兩種粒徑的納米粒，證明了粒徑的大小一定程度上影響了納米粒進(jìn)入淋巴管的效率。納米粒引流進(jìn)淋巴管后到達(dá)淋巴結(jié),粒徑較大的納米粒更易滯留于淋巴結(jié)。Zhang等證明了淋巴結(jié)中小粒徑的納米粒（5~15 nm）易被濾泡樹(shù)突狀細(xì)胞清除，而大粒徑的納米粒（50~100 nm）可在淋巴結(jié)中保留5周以上，并且抗原遞送效果比前者增加了175倍。此外，對(duì)于靜脈給藥的納米粒，粒徑大小也影響其在淋巴系統(tǒng)的富集。Cabral等制備了載有（1,2-二氨基環(huán)己烷）鉑（Ⅱ）的30和70 nm聚合物膠束。靜脈注射后，30 nm的膠束在發(fā)生轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中的蓄積量比70 nm的更高，有效抑制了黑色素瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，這是由于小粒徑的膠束更容易從血管壁中滲透進(jìn)入組織間質(zhì)，隨后進(jìn)入淋巴管富集于淋巴結(jié)。
2.1.3 親疏水性
納米粒表面的親水親脂特性也影響其進(jìn)入淋巴系統(tǒng)的效率。皮下給藥后，具有親水性表面的納米粒易于通過(guò)組織間隙引流進(jìn)入淋巴管。Moghimi等證明了與mPEG 350脂質(zhì)修飾的脂質(zhì)體相比，用相對(duì)分子質(zhì)量更大、鏈長(zhǎng)更長(zhǎng)、親水性更強(qiáng)的mPEG 2000修飾的脂質(zhì)體表現(xiàn)出更快更強(qiáng)的淋巴引流。納米粒表面疏水性增強(qiáng)導(dǎo)致其不易從注射部位引流進(jìn)入淋巴管，而更傾向于被組織間隙的抗原遞呈細(xì)胞攝取后一同進(jìn)入淋巴管，這一淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程速率較慢。
2.1.4 表面電荷
表面電荷對(duì)于納米粒引流進(jìn)入淋巴管也至關(guān)重要。組織間質(zhì)中含大量負(fù)電性的糖胺聚糖，因此中性及帶負(fù)電的納米粒更易從間質(zhì)引流入淋巴管，而帶正電的粒子在間質(zhì)中的保留增加，在皮下形成“儲(chǔ)庫(kù)”，粒子緩慢進(jìn)入淋巴管或被間質(zhì)中的抗原遞呈細(xì)胞攝取后一同進(jìn)入淋巴管。而在納米粒進(jìn)一步引流入淋巴結(jié)的過(guò)程中，表面電荷會(huì)對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞的攝取有一定影響，樹(shù)突細(xì)胞更易于攝取正電性粒子。
2.2 淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)
納米載體從組織間隙進(jìn)入淋巴管主要有3種方式（圖1）：（1）旁細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)途徑（被動(dòng)靶向）——通過(guò)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞間的間隙擴(kuò)散進(jìn)入淋巴管；（2）跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)途徑（主動(dòng)靶向）——經(jīng)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)胞吞作用進(jìn)入淋巴管；（3）抗原遞呈細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn)途徑——被組織間質(zhì)中的抗原遞呈細(xì)胞（如樹(shù)突狀細(xì)胞）攝取后進(jìn)入淋巴管。
2.2.1 被動(dòng)靶向藥物遞送系統(tǒng)
相較于血管，淋巴管的內(nèi)皮細(xì)胞之間連接松散，并且基底膜不完整，管腔寬大，因而更易于滲透。基于旁細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)途徑的被動(dòng)靶向藥物遞送系統(tǒng)主要通過(guò)調(diào)節(jié)載體的尺寸及表面性質(zhì)實(shí)現(xiàn)其在淋巴系統(tǒng)的富集。Chen等在兔乳腺癌轉(zhuǎn)移模型中評(píng)價(jià)了皮下、靜脈或聯(lián)合兩種給藥方式后阿霉素脂質(zhì)體（約120 nm）的抗腫liu轉(zhuǎn)移作用。結(jié)果顯示，靜脈給藥后，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶被顯zhu抑制。皮下給藥后，腋窩和縱隔淋巴結(jié)中的轉(zhuǎn)移灶能得到更有效的抑制。當(dāng)聯(lián)合兩種途徑給藥時(shí)，不僅可以治療局部區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，還對(duì)遠(yuǎn)處肺和肝中的轉(zhuǎn)移灶有顯zhu抑制作用，證明了脂質(zhì)體能夠有效遞送藥物至淋巴系統(tǒng)，采用聯(lián)合給藥方式能夠更有效控制潛伏在局部和遠(yuǎn)端組織中的腫瘤轉(zhuǎn)移。Doddapeneni等制備了聚乙二醇-聚（ε-己內(nèi)酯）納米粒，共載了多西他賽、依維莫司、LY294002 3種藥物。在接近腫瘤的部位皮下給藥后，納米粒優(yōu)先進(jìn)入淋巴系統(tǒng)，有效抑制黑色素瘤的淋巴轉(zhuǎn)移，并顯zhu降低了化療藥物的不良反應(yīng)。Zhang等將黑色素瘤相關(guān)的抗原肽（TRP2）和Toll樣受體4激動(dòng)劑（MPLA）共載于由聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）構(gòu)筑的納米粒中。肌內(nèi)給藥后發(fā)現(xiàn)納米?？砂邢蜻M(jìn)入淋巴管，隨后引流進(jìn)入淋巴結(jié)，被其中的樹(shù)突狀細(xì)胞攝取后引起抗原特異性的T細(xì)胞應(yīng)答，進(jìn)一步抑制腫瘤進(jìn)程。Kaminskas等構(gòu)建了聚乙二醇化聚-L-賴氨酸樹(shù)形分子和非聚乙二醇化樹(shù)形分子，皮下給藥后由于聚乙二醇化增大了樹(shù)形分子的親水性，因而相較于非聚乙二醇化樹(shù)形分子，聚乙二醇化的樹(shù)形分子從注射部位向淋巴管引流顯zhu增加。Jiang等構(gòu)建了共載抗原OVA與佐劑CpG的氫氧化鋁納米粒（約90 nm）。皮下給藥后，納米粒不僅可靶向進(jìn)入淋巴管，還能夠被淋巴結(jié)內(nèi)樹(shù)突狀細(xì)胞高xiao攝取，促進(jìn)樹(shù)突狀細(xì)胞的成熟，顯zhu提升IL-12、TNF-α、IFN-γ的分泌，誘導(dǎo)了CD8+ T細(xì)胞反應(yīng)，顯zhu抑制了小鼠黑色素瘤的生長(zhǎng)。Hong等合成了3種不同孔徑（12.9、10.3、7.8 nm）的包載OVA的介孔硅納米粒（約80 nm）。皮下給藥后，介孔硅納米粒借助小粒徑從給藥部位進(jìn)入淋巴管。介孔孔徑的大小對(duì)介孔硅納米粒的淋巴靶向效率、被樹(shù)突狀細(xì)胞的攝取效率以及促進(jìn)其成熟等方面沒(méi)有顯zhu影響，但抗原遞呈效率隨著介孔孔徑的增大而增強(qiáng)，導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答的強(qiáng)度增強(qiáng)。
2.2.2 主動(dòng)靶向藥物遞送系統(tǒng)
為了進(jìn)一步增強(qiáng)納米載體靶向淋巴遞藥的能力，主動(dòng)靶向遞藥系統(tǒng)也得到了廣fan的研究。主動(dòng)靶向策略通常是指在納米粒表面修飾配體，該配體能被組織或細(xì)胞上過(guò)表達(dá)的特異性受體識(shí)別并結(jié)合，促進(jìn)納米粒的內(nèi)化和轉(zhuǎn)運(yùn)。
Lyp-1是一種含有9個(gè)氨基酸的環(huán)肽，可與腫瘤細(xì)胞及腫瘤相關(guān)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表面過(guò)度表達(dá)的P32受體發(fā)生特異性的結(jié)合，但正常的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞不能與Lyp-1進(jìn)行結(jié)合。因此，Lyp-1可作為淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)的靶向配體。Yan等合成了綴合LyP-1的負(fù)載阿霉素聚乙二醇化脂質(zhì)體。體內(nèi)近紅外熒光成像和體外細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)證明，LyP-1的修飾增加了脂質(zhì)體在發(fā)生轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中的富集，但并未增加其在正常淋巴結(jié)中的富集。體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，LyP-1修飾脂質(zhì)體對(duì)淋巴轉(zhuǎn)移性腫瘤表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑制作用。Luo等也證明了修飾Lyp-1的納米粒在轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的富集量是未修飾的8倍，表明LyP-1具有高xiao的靶向腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移灶的能力。
乙酰肝素酶（HPA）主要參與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的重塑，可降解ECM和血管壁中的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖，從而促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲，其在高轉(zhuǎn)移腫瘤中過(guò)表達(dá)。Dafni等證明了HPA在轉(zhuǎn)移的腘窩淋巴結(jié)中的表達(dá)顯zhu增加，而在原發(fā)性腫瘤中沒(méi)有表達(dá)。低相對(duì)分子質(zhì)量肝素是一種帶負(fù)電荷、可生物降解的水溶性天然多糖，可結(jié)合并抑制HPA。Ye等合成了修飾低相對(duì)分子質(zhì)量肝素的脂質(zhì)體用于多西他賽的淋巴靶向遞送，考察了其在人源宮頸癌HeLa細(xì)胞的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移小鼠模型中皮下注射后的靶向效果，結(jié)果表明：與未修飾的多西他賽脂質(zhì)體相比，皮下注射低相對(duì)分子質(zhì)量肝素修飾的脂質(zhì)體在轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)中的蓄積量顯zhu提高，靶向效率約為前者的2.83倍，證明了低相對(duì)分子質(zhì)量肝素的修飾可提高納米載體對(duì)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的靶向能力。
Yang等發(fā)現(xiàn)TMTP1肽可特異性結(jié)合多種高轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞，包括前列腺癌PC-3M-1E8細(xì)胞、肺巨細(xì)胞癌PG-BE1細(xì)胞、乳腺癌MDA-MB-435S細(xì)胞，胃癌MKN-45sci細(xì)胞，但不結(jié)合非轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞，如前列腺癌PC-3M-2B4細(xì)胞、肺巨細(xì)胞癌PG-LH7細(xì)胞、乳腺癌MCF-7細(xì)胞。Wei等合成了修飾和未修飾TMTP1的吲哚菁綠聚合物膠束，考察其在人源宮頸癌HeLa細(xì)胞的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移小鼠模型中的靶向效果，結(jié)果表明皮下給藥30 min后，前者在腘窩淋巴結(jié)中濃度為后者的4.21倍。
組織間質(zhì)中的高密度脂蛋白（HDL）主要通過(guò)淋巴管進(jìn)入血液循環(huán)。Lim等研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠后足墊皮下注射DiI熒光標(biāo)記的HDL后，大量的HDL被內(nèi)化進(jìn)入淋巴管，這一過(guò)程是由淋巴管內(nèi)皮表達(dá)的清道夫受體介導(dǎo)的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)，證明了HDL是一種體內(nèi)天然的淋巴靶向的配體，可用于構(gòu)建淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)。Kuai等應(yīng)用DMPC脂質(zhì)和載脂蛋白A1模擬肽合成了HDL納米盤，皮下給藥后HDL納米盤顯zhu提高了負(fù)載的抗原和佐劑在淋巴結(jié)的蓄積與滯留，并且產(chǎn)生的特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞反應(yīng)比可溶性疫苗高近47倍。
2.2.3 靶向抗原遞呈細(xì)胞的藥物遞送系統(tǒng)
樹(shù)突狀細(xì)胞具有攝取和遞呈抗原，活化和擴(kuò)增幼稚、記憶性T細(xì)胞，從而誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)大的免疫反應(yīng)的能力，是體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞。淋巴結(jié)內(nèi)有大量成熟與未成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞。當(dāng)納米粒被樹(shù)突狀細(xì)胞攝取后，可隨樹(shù)突狀細(xì)胞進(jìn)入淋巴管，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，對(duì)抗轉(zhuǎn)移性腫瘤。研究報(bào)道，CD11c、Dec205、CD40、MUC-1、DC-SIGN、Dectin-1、甘露糖等都可與樹(shù)突狀細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合，可作為靶向樹(shù)突狀細(xì)胞的配體。Zhang等合成了可靶向樹(shù)突狀細(xì)胞的納米粒。該納米粒由4部分組成：
（1）兩親性聚合物自組裝成納米粒核心用于包封疏水性的Toll樣受體7/8激動(dòng)劑咪喹莫特；
（2）核心外層包被了陽(yáng)離子脂質(zhì)層，其中負(fù)載了Toll樣受體4激動(dòng)劑MPLA；
（3）靜電吸附陰離子抗原OVA；
（4）脂質(zhì)層上連接了靶向樹(shù)突狀細(xì)胞的配體——甘露糖。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，皮下注射修飾和未修飾甘露糖的納米粒后，樹(shù)突狀細(xì)胞對(duì)前者的攝取是后者的2~3倍。修飾甘露糖的納米粒能夠更有效地促進(jìn)樹(shù)突狀細(xì)胞成熟、淋巴細(xì)胞活化、抗原交叉呈遞、CD4+和CD8+ T細(xì)胞反應(yīng)，從而產(chǎn)生更多的記憶T細(xì)胞、抗體和干擾素γ，顯zhu抑制腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移。Wang等合成了兩種遞送抗原的載體，一種是將抗原包封于陽(yáng)離子脂質(zhì)體中，另一種是在上述載體表面修飾了甘露糖。皮下注射后體內(nèi)熒光成像顯示前者注射后4 h在引流淋巴結(jié)中聚集，后者在注射后30 min就在引流淋巴結(jié)中聚集，并且注射后4~96 h后者在淋巴結(jié)中聚集量顯zhu比前者高，這是由于前者帶正電大部分聚集在注射部位，而后者被樹(shù)突狀細(xì)胞攝取后可以有效地從注射部位引流進(jìn)入淋巴結(jié)，并且在給藥3個(gè)月后仍然可以持續(xù)的產(chǎn)生抗體，引起免疫應(yīng)答。
03 總結(jié)和展望
淋巴系統(tǒng)是腫瘤轉(zhuǎn)移的重要途徑，腫瘤細(xì)胞隨淋巴管引流進(jìn)入前哨淋巴結(jié)，在此處不斷增殖并形成微轉(zhuǎn)移灶，一旦淋巴結(jié)被“填滿”，腫瘤細(xì)胞會(huì)擴(kuò)散到下一個(gè)淋巴結(jié)，由此形成多個(gè)轉(zhuǎn)移灶，擴(kuò)散至全身，治療難度大。傳統(tǒng)的化療藥物由于無(wú)法在淋巴系統(tǒng)中達(dá)到有效治療濃度，對(duì)腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移收效甚微。淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)可以輔助藥物進(jìn)入淋巴管并富集于淋巴結(jié)，提高了藥物在淋巴系統(tǒng)中的濃度，對(duì)治療腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移有著較好的療效。但是，淋巴靶向藥物遞送系統(tǒng)仍存在一些問(wèn)題和挑戰(zhàn)。通過(guò)調(diào)節(jié)載體的尺寸及表面性質(zhì)可實(shí)現(xiàn)其在淋巴系統(tǒng)的富集，然而載體的尺寸的設(shè)計(jì)是一把“雙ren劍”，小粒徑納米粒更易于從注射部位引流進(jìn)入淋巴管，而大粒徑納米粒更易于滯留于淋巴結(jié)。同樣，負(fù)電荷納米粒易于從注射部位引流進(jìn)入淋巴管，而正電荷納米粒更易被淋巴結(jié)內(nèi)樹(shù)突狀細(xì)胞攝取。對(duì)于基于配體-受體介導(dǎo)的主動(dòng)靶向藥物遞送系統(tǒng)，目前已發(fā)現(xiàn)的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的受體不多，并且部分與血管內(nèi)皮細(xì)胞上的受體有重合。靶向抗原遞呈細(xì)胞的藥物遞送系統(tǒng)主要是由樹(shù)突狀細(xì)胞表面受體與配體相互作用介導(dǎo)的，然而樹(shù)突狀細(xì)胞表面有很多受體，選擇靶向不同受體是否會(huì)對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞的攝取效率產(chǎn)生影響也需深入研究。
